Questo volume presenta una prospettiva storica su Morpholinos, una panoramica delle buone pratiche di Morpholinos, tecniche per controllare l’attività di Morpholino con la luce, tecniche per modulare il microRNA
Cosa sono gli oligomeri di morfolino fosforodiamidato?
Gli oligomeri di morfolino fosforodiamidato (PMO) sono brevi analoghi del DNA a filamento singolo costruiti su una spina dorsale di anelli morfolinici collegati da legami fosforodiamidato.
Cos’è il morfolino oligo?
Gli oligo morfolino sono strumenti avanzati per bloccare i siti sull’RNA per ostacolare i processi cellulari. Un Morpholino oligo si lega specificamente al sito target selezionato per bloccare l’accesso dei componenti cellulari a quel sito target.
Come funziona un morfolino?
I morfolinos bloccano l’accesso di altre molecole a sequenze specifiche piccole (~ 25 basi) delle superfici di accoppiamento delle basi dell’acido ribonucleico (RNA). I morfolinos sono usati come strumenti di ricerca per la genetica inversa abbattendo la funzione genica. Il knockdown genico si ottiene riducendo l’espressione di un particolare gene in una cellula.
Perché un ibrido morfolino di RNA target non promuove la degradazione dell’mRNA?
Poiché l’RNA è degradato, qualsiasi sequenza all’interno della regione codificante del gene bersaglio ha il potenziale per essere un utile sito antisenso. I morfolinos, al contrario, formano ibridi RNA-morfolino che non sono substrati per RNase H, e quindi l’mRNA non viene degradato.
Qual è la differenza tra oligonucleotidi antisenso e Sirna?
Entrambi sono acidi nucleici e contengono un filamento antisenso destinato a riconoscere un mRNA bersaglio. Hanno anche differenze importanti. Gli ASO hanno un filamento mentre i siRNA ne hanno due, un fatto fondamentale che può ridurre i costi e semplificare la consegna.
Gli oligonucleotidi antisenso sono terapia genica?
Le terapie genetiche come l’oligonucleotide antisenso (ASO) e l’interferenza dell’RNA (RNAi) fanno esattamente questo. Attraverso l’accoppiamento canonico di basi Watson-Crick (figura 1A), questi farmaci legano singoli RNA per modulare l’espressione genica e quindi la disponibilità di proteine.
A cosa servono i morfolino?
I morfolinos sono tipicamente usati per bloccare la traduzione dell’mRNA e per bloccare lo splicing del pre-mRNA, sebbene possano bloccare altre interazioni tra macromolecole biologiche e RNA. I morfolinos sono efficaci, specifici e privi di effetti non antisenso.
Cosa fanno gli oligonucleotidi antisenso?
Gli oligonucleotidi antisenso (AS ON) sono oligomeri sintetici del DNA che si ibridano a un RNA bersaglio in un modo sequenza-specifico. Sono stati impiegati con successo per inibire l’espressione genica, modulare lo splicing di un RNA messaggero precursore o inattivare i microRNA.
Come si abbatte un gene?
L’interferenza dell’RNA (RNAi) è un mezzo per silenziare i geni attraverso la degradazione dell’mRNA. Il knockdown genico con questo metodo si ottiene introducendo piccoli RNA interferenti a doppio filamento (siRNA) nel citoplasma. Piccoli RNA interferenti possono provenire dall’interno della cellula o possono essere introdotti esogenamente nella cellula.
Quanto è lungo un oligonucleotide?
Gli oligonucleotidi sono piccole molecole lunghe 8-50 nucleotidi che si legano tramite l’accoppiamento di basi Watson-Crick per migliorare o reprimere l’espressione dell’RNA bersaglio.
Cos’è la tecnologia Anti Sense?
La tecnologia antisenso è un processo mediante il quale un pezzo di RNA che è complementare in sequenza a /77RNA viene utilizzato per arrestare l’espressione di un gene specifico. Il wRNA antisenso è sintetizzato mediante trascrizione. Questo si lega prontamente con wRNA specifico e blocca la traduzione.
Qual è la spina dorsale dell’ANP?
L’acido peptidico nucleico (PNA) è un polimero sintetizzato artificialmente simile al DNA o all’RNA. Non è noto che il PNA sia presente in natura, ma è stato ipotizzato che la N-(2-amminoetil)-glicina (AEG), la spina dorsale del PNA, sia una prima forma di molecola genetica per la vita sulla terra ed è prodotta dai cianobatteri.
Come vengono somministrati gli oligonucleotidi antisenso?
Ad oggi, la maggior parte delle terapie con oligonucleotidi (e quasi tutti i farmaci approvati per l’acido nucleico) si sono concentrati sulla somministrazione locale (ad esempio, all’occhio o al midollo spinale) o sulla somministrazione al fegato.
Qual è la differenza tra antisenso e RNAi?
Per terapia antisenso si intende l’inibizione selettiva e sequenza-specifica dell’espressione genica da parte di oligonucleotidi di DNA a singolo filamento. Al contrario, l’interferenza dell’RNA (RNAi) è innescata dall’RNA a doppio filamento (dsRNA) e provoca la degradazione dell’mRNA specifica della sequenza degli RNA bersaglio a singolo filamento in risposta al dsRNA.
Perché si chiama filamento antisenso?
Il secondo filamento è chiamato filamento antisenso perché la sua sequenza di nucleotidi è il complemento del senso del messaggio. Quando l’mRNA forma un duplex con una sequenza di RNA antisenso complementare, la traduzione è bloccata.
In che modo il siRNA influenza l’espressione genica?
Il silenziamento genico post trascrizionale indotto da siRNA inizia con l’assemblaggio del complesso di silenziamento indotto dall’RNA (RISC). Il complesso silenzia una certa espressione genica scindendo le molecole di mRNA che codificano i geni bersaglio. Questa scissione si traduce in frammenti di mRNA che vengono ulteriormente degradati dalle esonucleasi cellulari.
Dove si trova Microrna?
Tendenze. I miRNA maturi si localizzano in più posizioni subcellulari nel citoplasma, come granuli di RNA, endomembrane e mitocondri, e secernono cellule esterne tramite esosomi. Studi recenti hanno rivelato che i miRNA maturi possono anche localizzarsi nel nucleo, dove potrebbero funzionare nella regolazione epigenetica.
In che modo l’interferenza dell’RNA regola l’espressione genica?
L’interferenza dell’RNA (RNAi) è un processo biologico in cui le molecole di RNA sono coinvolte nella soppressione specifica della sequenza dell’espressione genica da parte dell’RNA a doppio filamento, attraverso la repressione traslazionale o trascrizionale.
La terapia genica è antisenso?
La terapia antisenso comporta la downregulation dell’espressione genica mediante il legame oligonucleotidico complementare all’mRNA bersaglio. Gli oligonucleotidi antisenso sono brevi sequenze di DNA a filamento singolo progettate per essere complementari all’orientamento specifico del “senso” (da 5 “a 3”) dell’mRNA che codifica per la proteina bersaglio.
La terapia antisenso è una terapia genica?
La terapia genica antisenso è una tecnica di silenziamento genico simile all’interferenza dell’RNA, ma utilizza un meccanismo leggermente diverso. La terapia è chiamata tecnica di silenziamento genico perché, invece di riparare il gene, mira a “silenziare” l’effetto del gene.
Come funzionano le droghe antisenso?
Farmaco antisenso: un farmaco contenente parte del filamento non codificante dell’RNA messaggero (mRNA), una molecola chiave coinvolta nella traduzione del DNA in proteine. I farmaci antisenso si ibridano con l’mRNA e lo inattivano. Ciò impedisce a un particolare gene di produrre la proteina di cui contiene la ricetta.
Cos’è un oligonucleotidi antisenso di Gapmer?
Da Wikipedia, l’enciclopedia libera. I gapmer sono brevi strutture oligonucleotidiche antisenso del DNA con segmenti simili all’RNA su entrambi i lati della sequenza. Questi pezzi lineari di informazioni genetiche sono progettati per ibridarsi con un pezzo bersaglio di RNA e mettere a tacere il gene attraverso l’induzione della scissione dell’RNasi H.
Gli siRNA sono oligonucleotidi?
Qual è la via del siRNA?
I piccoli RNA interferenti (siRNA) sono una diversa tecnologia oligonucleotidica che utilizza forcine di RNA corte a doppio filamento per innescare la degradazione delle molecole di mRNA mirate.