Sovraccarico di volume: l’iniezione di un volume troppo grande può provocare un fronte, poiché amplia il picco. Puoi eliminare questa possibilità iniettando un volume più piccolo.
Cosa causa il fronting in HPLC?
Il fronting dei picchi si verifica quando viene superata la capacità del campione della colonna analitica, cosa che può verificarsi sia negli esperimenti GC che HPLC. Questo effetto di sovraccarico deriva dalla scarsa solubilità del campione nella fase stazionaria, dall’iniezione di una quantità eccessiva di campione o dal funzionamento a un valore “k” (fattore di capacità) troppo basso.
Come si riduce il fronting di picco?
Più sottile è il film in fase liquida, minore è la quantità di ciascun composto che può essere trattenuta dalla colonna. Per prevenire il fronting, ridurre il volume di iniezione, aumentare il rapporto di divisione o iniettare un campione meno concentrato.
Come si può superare il tailing in HPLC?
Esistono alcuni metodi che possono essere utilizzati per evitare l’accodamento dei picchi:
Operare a un pH inferiore.
Utilizza una colonna altamente disattivata.
Considera la possibilità di un sovraccarico di massa.
Considerare la possibilità di deformazione del letto della colonna.
Lavorare a pH elevato durante l’analisi di composti basici.
Utilizzare una procedura di pulizia del campione.
Cos’è il peak tailing e il fronting?
Peak Tailing Tailing è fondamentalmente l’inverso del fronting. Il picco è presentato in modo asimmetrico, con una seconda metà più ampia e una prima metà più stretta, staccandosi dalla forma ideale del picco, con il suo profilo gaussiano simmetrico. Potrebbero inoltre verificarsi interazioni secondarie, che distorcono la forma del picco.